助力基孔肯雅熱病毒檢測
近期，基孔肯雅熱的出現再次牽動著公眾的心。2025 年 7 月 15 日，佛山市順德區(qū)通報了一起由境外輸入引發(fā)的基孔肯雅熱本地疫情，截至 7 月 24 日，佛山全市已累計報告確診病例 3645 例。基孔肯雅熱作為一種蚊媒傳染病，其潛在的公共衛(wèi)生威脅不容小覷，需要我們給予足夠的重視和關注。
基孔肯雅熱病原學
基孔肯雅熱病毒（Chikungunya virus，CHIKV）屬于披膜病毒科甲病毒屬。病毒顆粒呈球形，直徑 60-70 nm，有包膜。其基因組為單股正鏈 RNA，全長約 11.8 kb，內含單一可讀框，依次編碼 4 種非結構蛋白和 5 種結構蛋白。
圖片來源于網絡
基孔肯雅熱流行病學
基孔肯雅熱的流行呈現出特定的地域、人群及時間分布規(guī)律。該病毒主要分布于非洲、南亞和東南亞地區(qū)。近年來，隨著全球化進程的不斷加快，人員流動和貿易往來日益頻繁，基孔肯雅熱也呈現出向其他地區(qū)擴散的趨勢。任何年齡人群均可感染發(fā)病，在新疫區(qū)或輸入性流行區(qū)，各年齡組人群發(fā)病無明顯差異。時間分布上，基孔肯雅熱的主要流行季節(jié)為夏、秋季；在熱帶地區(qū)，由于氣候溫暖濕潤，適宜伊蚊生存繁殖，因此一年四季均可流行。
基孔肯雅熱傳播途徑與風險
圖片來源于云南疾控
埃及伊蚊和白紋伊蚊是基孔肯雅熱的主要傳播媒介，且蚊體內的病毒可存活較長時間，甚至終生帶毒，這大大增加了病毒傳播的可能性。
基孔肯雅熱感染的臨床癥狀
基孔肯雅熱感染的急性期主要表現為突然起病的寒戰(zhàn)、高熱（體溫可達 39℃ 以上），發(fā)熱持續(xù) 1-7 天，80% 的患者在發(fā)病后 2-5 天軀干、四肢、手掌和足底出現斑疹、丘疹或紫癜等皮疹，伴有瘙癢，數天后消退并可能輕微脫屑，同時伴有多個關節(jié)和脊椎疼痛、腫脹及全身性肌痛，極少數患者還會出現腦膜腦炎等嚴重并發(fā)癥。
基孔肯雅熱與登革熱異同
二者均為蚊媒傳染病，在傳播與臨床表現上存在諸多關聯(lián)與差異。
相同點：
?傳播媒介：均主要通過埃及伊蚊和白紋伊蚊叮咬傳播。
?流行區(qū)域：均主要在熱帶和亞熱帶地區(qū)高發(fā)，非洲、南亞和東南亞為核心疫區(qū)。
?初期癥狀：均以發(fā)熱、頭痛、肌肉關節(jié)疼痛為主要表現，且無鼻塞、流涕等上呼吸道癥狀。
不同點：
?病原體差異：基孔肯雅熱由基孔肯雅病毒（1 個血清型）引起，登革熱由登革病毒（4 個血清型）導致，且血清型間存在抗原差異。
?關節(jié)癥狀不同：基孔肯雅熱以持續(xù)性、游走性小關節(jié)劇痛為顯著特征，部分患者癥狀遷延數月至數年；登革熱關節(jié)痛較輕，多累及大關節(jié)，持續(xù)時間短。
?出血傾向有別：基孔肯雅熱出血癥狀罕見且輕微；登革熱 25%-50% 病例出現出血現象，嚴重時可引發(fā)休克。
?免疫特點各異：基孔肯雅熱感染后可獲持久免疫力；登革熱僅對同血清型產生持久免疫，再次感染不同血清型可能加重病情。
嚴防輸入
近年來，我國多個地區(qū)已陸續(xù)出現由境外輸入導致的本地聚集性疫情，佛山順德的疫情案例為我們敲響了警鐘。外防輸入仍是當前防控工作的重點。中國疾控中心專家表示，基孔肯雅熱的傳播依賴特定蚊媒，只要做好蚊媒控制和輸入病例監(jiān)測，就能有效遏制其擴散。與一些高致病性傳染病相比，基孔肯雅熱的致病性相對有限，不會造成類似烈性傳染病的大規(guī)模傷亡。
基孔肯雅熱病毒檢測方法
基孔肯雅熱病毒常用檢測方法主要有 3 種，病毒分離、血清學檢測和核酸檢測。通過從患者血液、血清等標本中分離出基孔肯雅病毒，是確診的直接證據，但病毒分離培養(yǎng)周期長、操作復雜。通過檢測 IgM/IgG 抗體判斷病毒感染階段，但存在抗體產生窗口期限制，無法用于早期診斷。相比之下， RT-qPCR 核酸檢測技術憑借早期快速檢出、高靈敏度和高特異性等優(yōu)勢，能為臨床提供及時、準確的診斷依據，尤其適用于早期病例篩查和疫情監(jiān)測。
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1. qPCR 檢測
TransScript? II Multiplex Probe One-Step qRT-PCR SuperMix UDG（AQ322）
本產品為高靈敏度、高合成效率和高擴增效率的一步法 qRT-PCR 擴增試劑，高效地將 RNA 合成第一鏈 cDNA，進行 qPCR，在同一反應體系中一步完成從反轉錄到 qPCR 的全部反應。
產品特點
? 操作簡便，降低操作過程中的污染幾率。
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? 適用范圍廣，已成功用于新冠病毒、流感病毒、豬瘟病毒、豬藍耳病病毒、牛病毒性腹瀉病毒、對蝦虹彩病毒、白斑病毒、桃拉病毒等檢測。
? 穩(wěn)定性好，在反復凍融、常溫、37 ℃ 等條件下保存，均可穩(wěn)定擴增。
? 提供可凍干版本。
適用范圍
? 1~4 重 qRT-PCR 檢測。
? 高拷貝、低拷貝基因檢測。
? 高 GC 含量或具有復雜二級結構的 RNA 模板。
? RNA 病毒、微量 RNA 的檢測。
實驗數據
高靈敏度、高擴增效率
以梯度稀釋 (5×106 copies/ml-5×102 copies/ml，10 倍稀釋 ) 的新冠病毒體外轉錄 RNA 標準品和恒定濃度 HeLa 細胞總 RNA 混合物為模板，使用 TransGen 產品擴增 ORF1a、N 及 RNase P 基因 ( 內標基因 )。結果表明，TransGen 產品具有高的擴增效率及靈敏度。
多重 PCR 檢測
以梯度稀釋 (5×106 copies/ml-5×102 copies/ml，10 倍稀釋 ) 的新冠病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒體外轉錄 RNA 和恒定濃度的人 gDNA 混合物為模板，檢測 ORF1a/N 基因 ( 新型冠狀病毒 )、MP 基因 ( 甲型流感病毒 )、NP 基因 ( 乙型流感病毒 ) 和 RNase P 基因 ( 內標基因 )。結果表明，TransGen 產品可進行四重 PCR 檢測，靈敏度可達 5×102 copies/ml。
穩(wěn)定性強
不同保存條件處理后，TransGen 產品性能不受影響，仍可穩(wěn)定擴增。
2. 核酸提取
利用獨特的裂解液裂解病毒釋放 DNA/RNA，經硅膠膜離心柱特異吸附，有效地純化病毒DNA/RNA。適用于從血清、血漿、全血、組織勻漿液、無細胞體液、鼻咽或口咽抽吸物或洗液、肺泡灌洗液、氣管吸出物和痰液、鼻咽或口咽拭子、培養(yǎng)動物細胞上清中提取病毒 DNA/RNA。
產品特點
? 操作簡單。
? 提取量高，純度高。
? 提取的 DNA/RNA 適用于 PCR， RT- PCR，qPCR，qRT-PCR 等實驗。
MagicPure? Viral DNA/RNA Kit（含 Magnetic Stand）（EC301-01）
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產品特點
? 操作簡單，無需離心，提取速度快。
? 提取量高，純度高。
? 適用于高通量磁棒式核酸提取儀。
3. 核酸自動化提取儀
? 觸屏操控，自由編程
? 自控系統(tǒng)，安全智能
? 精確控制，高效控溫
? 紫外消毒，杜絕污染
? 結果穩(wěn)定，高效提取
產品列表
參考文獻：
? Chikungunya. A. M. Powers; C. H. Logue. Update November 2007.
? Changing patterns of chikungunya virus: re-emergence of a zoonotic arbovirus. Journal of General Virology. 2007.
? The global distribution and burden of chikungunya. Current Opinion in Infectious Diseases. 2012.
? A single mutation in chikungunya virus affects vector specificity and epidemic potential. PLoS Pathogens. 2007.
? Chikungunya virus and the global spread of a mosquito-borne disease. New England Journal of Medicine. 2015.
? The global burden of chikungunya: a systematic analysis. Lancet Infectious Diseases. 2016.
? The global distribution of the arbovirus vectors Aedes aegypti and Ae. albopictus. eLife. 2015.
? Genome microevolution of chikungunya viruses causing the Indian Ocean outbreak. Genome Research. 2006.
? Genetic and serologic analyses of chikungunya virus isolates from the Americas, Asia, and Africa. Journal of Virology. 2012.
? Chikungunya virus transmission by Aedes mosquitoes: an update. Viruses. 2018.
? The changing epidemiology of chikungunya virus: implications for control. Trends in Parasitology. 2019.
? 基孔肯雅熱診斷和治療方案.中華人民共和國國家衛(wèi)生健康委員會. 2013.
? 基孔肯雅熱預防控制技術指南 (2012 年版). 中華人民共和國國家衛(wèi)生健康委員會. 2012.
